摘要：谷氨酰胺轉氨酶(EC2.3.2.13, Transglutaminase, TGase)是一種重要的食品酶。基于N-端酶原區(qū)對折疊的重要影響,TGase通常以無活性的酶原(pro-TGase)形式在異源宿主中表達。以茂源鏈霉菌( Streptomyces mobaraensis )pro-TGase為基因來源,重組解脂耶氏酵母( Yarrowia lipolytica po1h)為研究對象,通過在pro-TGase插入宿主Kex2蛋白酶識別位點(策略1)和共表達pro-TGase與谷氨酰胺轉氨酶激活金屬蛋白酶(TAMEP,策略2),使pro-TGase在 Y. lipolytica 中表達后被切除酶原區(qū),而直接轉化為活性TGase。搖瓶發(fā)酵結果顯示,策略1和策略2構建得到的重組菌的TGase活力分別為5.26 U/mL和6.77 U/mL。酶學性質研究表明,策略1和策略2得到的重組菌的TGase比酶活、 Km及k cat / Km 均明顯優(yōu)于 S. mobaraensis TGase。基于 Y. lipolytica 食品安全性,研究結果為TGase的工業(yè)化生產提供了新型高產菌種。