摘要:目的: 針對不同胚源的大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞(BMSCs)表現(xiàn)出的衰老差異,探討組蛋白去甲基化酶Jmjd3對衰老的調(diào)控作用。 方法: 取大鼠下頜骨(M)和脛骨(T)后提取BMSCs原代培養(yǎng)并進行傳代,通過β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)衰老染色檢測細胞衰老特征,茜素紅染色檢測細胞成骨特征。通過實時定量RT-PCR、Western blot檢測Jmjd3及衰老因子在兩種BMSCs中的表達。構(gòu)建shJmjd3病毒敲減Jmjd3,轉(zhuǎn)染T-BMSCs檢測衰老指標(biāo)。在大鼠頜骨區(qū)域建立骨缺損模型,移植shJmjd3修飾的T-BMSCs,通過Micro-CT、Masson染色檢測Jmjd3被抑制的T-BMSCs對骨缺損區(qū)的修復(fù)作用。 結(jié)果: 經(jīng)SA-β-gal衰老染色,T-BMSCs中衰老細胞數(shù)量明顯多于M-BMSCs。Jmjd3及衰老因子在M-BMSCs低表達,在T-BMSCs高表達。轉(zhuǎn)染shJmjd3病毒導(dǎo)致T-BMSCs中Jmjd3及衰老因子低表達。移植敲減Jmjd3的T-BMSCs,Micro-CT顯示其骨平均密度,骨體積分數(shù)明顯升高,Masson染色顯示其骨小梁結(jié)構(gòu)增多。 結(jié)論: 不同胚源大鼠BMSCs的衰老特征具有差異性,將T-BMSCs中Jmjd3抑制以后,可以增強細胞的抗衰老能力,有利于體內(nèi)的骨修復(fù)的治療。
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