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        首頁 > 期刊 > 華北農學報 > 薺菜生長素極性運輸基因1(CbPIN1)的克隆與表達分析 【正文】

        薺菜生長素極性運輸基因1(CbPIN1)的克隆與表達分析

        作者:劉曉柱; 李銀鳳 貴州理工學院; 貴州貴陽550003

        摘要:為了探討薺菜PIN1基因的生物學功能,根據Gen Bank中擬南芥PIN1氨基酸序列,設計同源引物,通過RT-PCR技術,克隆了薺菜PIN1基因(CbPIN1)編碼區c DNA序列;生物信息學方法分析了薺菜PIN1蛋白結構特征,并進行了亞細胞定位與原核表達;熒光定量PCR方法檢測了PIN1組織表達特性;構建了植物表達載體p BI121-CbPIN1,并獲得轉基因植株。結果表明,CbPIN1 c DNA序列全長1 869 bp,C+G含量為49%。Blast比對結果顯示,CbPIN1與擬南芥PIN1基因高度同源,相似性高達93%。進一步分析發現,CbPIN1可編碼1條622個氨基酸的多肽,CbPIN1蛋白分子質量為67. 05 ku,等電點為9. 02,堿性氨基酸(K、R)個數為49,酸性氨基酸(D、E)個數為42,疏水氨基酸(A、I、L、F、W、V)個數為241,極性氨基酸(N、C、Q、S、T、Y)個數為157。CbPIN1屬于跨膜蛋白,含12個絲氨酸磷酸化位點,1個蘇氨酸磷酸化位點。亞細胞定位結果顯示,CbPIN1定位于細胞膜;CbPIN1在薺菜不同組織均有表達,其中,根中表達最高,種子中表達最低。原核表達顯示CbPIN1蛋白大小87. 05 ku。過表達薺菜植株中CbPIN1基因表達量均顯著增加。試驗結果為進一步分析CbPIN1在薺菜器官發育中的作用奠定了基礎。

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        華北農學報雜志, 雙月刊,本刊重視學術導向,堅持科學性、學術性、先進性、創新性,刊載內容涉及的欄目:研究報告、文獻綜述、簡報、專題研究等。于1986年經新聞總署批準的正規刊物。

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