摘要：液體核磁共振擴(kuò)散序譜(DOSY)可以通過測定溶質(zhì)分子的自擴(kuò)散系數(shù)(Dt)來研究該分子在溶液中的表觀分子量(M).Dt與測試體系和分子本身性質(zhì)相關(guān),蛋白質(zhì)體系較為復(fù)雜,從而增加了蛋白質(zhì)自擴(kuò)散系數(shù)(Dt-protein)測定的難度.本文以3-(三甲基硅基)丙磺酸鈉(DSS)為內(nèi)標(biāo),以蛋白質(zhì)分子與DSS自擴(kuò)散系數(shù)的比值(Dr)來表征蛋白質(zhì)分子在溶液中的表觀分子量(Mprotein),該方法降低了緩沖體系對Mprotein的影響,使得Mprotein主要由分子本身的性質(zhì)決定.在此基礎(chǔ)上,測定了不同分子量蛋白質(zhì)分子相對于DSS的Dr,擬合得到了Dr與Mprotein的相關(guān)關(guān)系:lgMprotein=-2.6488 lgDr-0.7863,相關(guān)系數(shù)(R^2)為0.997.最后測定了通過大腸桿菌表達(dá)純化得到的SARS冠狀病毒主蛋白酶C端結(jié)構(gòu)域(M^pro-C)分子相對于DSS的Dr,并計(jì)算出與文獻(xiàn)結(jié)果一致的Mprotein,進(jìn)一步驗(yàn)證了擬合公式的準(zhǔn)確性和實(shí)用性.